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使用液相色譜法一次測定多種水溶性維生素
來源:儀器信息網 | 作者:儀器信息網 | 發布時間: 2019-06-25 | 1767 次瀏覽 | 分享到:
本簡報介紹了用**液相色譜法可同時檢測多種水溶性維生素,標準曲線線性良好。并且借助二極管陣列檢測器,可對食品和其他含有大量雜質的樣品進行精確有效的分析,排除假陽性性峰的干擾。由于維生素C和異抗壞血酸不穩定,在樣品制備過程中或隨著時間的推移,二者容易發生分解,因此難以獲得良好的線性和重現性。所以,此方法適用于定量分析,在定量分析時,建議對各維生素單獨測定。

       維生素是人體重要的營養物質,但有些維生素在人體內無法合成,或合成量不能滿足機體需要,要從外界攝取以滿足人體需要。維生素根據溶解度的不同,分為水溶性和脂溶性兩類,水溶性維生素主要有維生素C、B1、B2、B3、B5、B6、B11和B12。不同水溶性維生素的結構差異較大,化學性質不穩定,分離檢測較為復雜困難。

       目前水溶性維生素的測定方法主要有分光光度法、分子熒光法和**液相色譜法等。分光光度法的樣品前處理較復雜,且干擾物多,測定結果偏高。分子熒光法的樣品前處理也復雜,定量不精確。**液相色譜法的樣品前處理簡單,用量少,可一次分析多種水溶性維生素,是目前*合適的測定方法。


實驗部分

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      采用離子對試劑(四丁銨)作為流動相,由于離子對試劑易吸附在色譜柱上不易**清除,因此建議用來分析水溶性維生素的色譜柱專用。


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圖1. 9種水溶性維生素標準品的色譜圖(上)和等高線圖(下)

1. 維生素 B1 (硫胺素) *    2. 維生素 B6 (吡哆素) *  3. 煙酰胺  

          4. 維生素 B12 (氰鈷胺素)   5. 抗壞血酸糖苷  6. 維生素 C (抗壞血酸)  

                                                                                      7. 異抗壞血酸   8. 維生素 B2 (核黃素)   9. 菸堿酸


       使用二極管陣列檢測器(簡稱:DAD),除了色譜圖外,還可獲得光譜圖,兩者結合可排除僅通過色譜保留時間定性造成的假陽性峰,能對食品和其他含有大量雜質的樣品進行精確有效的分析。

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                                                                                                                     圖2. 維生素B6的標準曲線

      9種水溶性維生素的標準曲線(濃度范圍0.1 ~ 50 mg/L)均顯示了良好的線性, r2 均≥ 0.996。但采用流動相進行稀釋時,維生素C、異抗壞血酸和維生素B12 不穩定,為獲得良好的線性,需使用新配制的溶液進行測定。

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                                                                                      圖3. 保健飲料的測定結果

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                                                          圖4. 營養補充劑的測定結果

       該方法可同時檢測多種水溶性維生素,標準曲線線性良好。借助二極管陣列檢測器,可對食品和其他含有大量雜質的樣品進行精確有效的分析,排除假陽性性峰的干擾。由于維生素C和異抗壞血酸不穩定,在樣品制備過程中或隨著時間的推移,二者容易發生分解,因此難以獲得良好的線性和重現性。所以,此方法適用于定量分析,在定量分析時,建議對各維生素單獨測定。


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