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技術原理
TMT試劑由三部分組成:質量報告基團、質量標準化基團和氨基反應基團。
質量報告基團有10種不同的分子量,質量標準化基團也10有種不同的分子量,與不同的報告基團搭配,能保證被標記的不同來源的同一肽段在一級質譜中具有相同的質荷比;氨基反應基團能與肽段N端及賴氨酸側鏈氨基發生共價連接使肽段連上標記。
一級質譜中,任何一種TMT試劑標記的不同樣品中的同一肽段表現出相同的質荷比;二級質譜中,可切割鍵(箭頭所指)斷裂釋放出TMT報告離子,在質譜低質量區產生了10個TMT報告離子峰,其強度反應了該肽段在不同樣品中的相對表達量信息,另外二級質譜中的肽段碎片離子峰質荷比反應了該肽段的序列信息;這些質譜原始數據經過數據庫檢索,可得到蛋白質的定性和相對定量信息。
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